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运送医疗废物应当使用防渗漏、防遗撒、无锐利边角、 易于装卸和清洁的专用运送工具。 在主实验室应合理设置三区:清洁区、半污染区、污染区。 根据《医疗废物管理条例》,卫生部将医疗废物分为感染性废物、病理性废物、损伤废物、药物性废物、化学性废物五类。 细菌一般进行 无性 繁殖,即裂殖。 酵母的繁殖方式分为有性和无性两类,无性繁殖又可分为芽殖、裂殖两种形式,有性繁殖时形成子囊; 霉菌在有性繁殖中产生的有性孢子种类主要有 子囊孢子, 接合孢子 。 在酵母菌细胞结构中,细胞壁具有保护细胞及维持细胞外形的功能;细胞膜具有控制细胞对营养物及代谢产物的吸收和交换作用; 细胞质 是细胞进行生命活动,新陈代谢的场所; 线粒体 是呼吸酶类的载体,细胞的能量供应站; 细胞核 具有传递细胞遗传性状的作用。 霉菌的菌丝在功能上有一定的分化,可分为 营养菌丝 和 气生菌丝。 微生物在生命活动中,所必需的营养物质包括 水、碳源、氮源、无机盐、生长因子 五种。 要使玻璃器皿达到无菌状态,一般用 干热灭菌 方法灭菌,而培养基则采用 湿热灭菌 方法来灭菌。 志贺菌属可分为 痢疾 、福氏、鲍氏 、宋内氏四个群,引起的食物中毒以 宋内氏和福氏 为主。 金黄色葡萄球菌在 BP平板上的菌落为灰色到黑色,边缘淡色,周围有一浑浊带,在外层有透明圈。 革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤 弯曲菌属与人类感染有关的菌种: 胎儿弯曲菌胎儿亚种 、空肠弯曲菌、大肠弯曲菌 三种。 空肠弯曲菌在有氧和厌氧条件下培养时 不生长 ,在 5%氧气, 10% 二氧化碳, 85% 氮气的环境中生长良好。 空肠弯曲菌可引起食物中毒,其最严重的并发症是(GBS)格林巴利综合症 ,主要表现是运动神经功能障碍。 空肠弯曲菌检测时常用的分离平板是 mCCDA和 Skirrow 。 链球菌属按溶血现象可分为 甲型溶血性链球菌 、 乙型溶血性链球菌 、丙型溶血性链球菌3类。依据群特异性抗原结构不同,可分为 A- 猩红热是由产致热外毒素的 A群链球菌 菌引起的。 按照G 按照G BS琼脂平板分离沙门氏菌时,典型菌落颜色为 黑色 。 科玛嘉沙门氏菌显色培养基上,典型沙门氏菌菌落为 紫红色 。 科玛嘉沙门氏菌显色培养基上,大肠杆菌菌落为 蓝色 。 BS琼脂的中文全称为 亚硫酸铋琼脂 。 XLD琼脂的中文全称为 木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂 。 BS琼脂平板分离沙门氏菌时,培养时间为 40-48 h。 TTB增菌液增菌沙门氏菌时于 42±1 ℃培养 18-24h。 XLD琼脂平板分离沙门氏菌时,培养时间为18-24h。 沙门氏菌生化实验赖氨酸脱羧酶试验对照管反应后颜色为 黄色,阳性管为紫色 。 沙门氏菌生化实验赖氨酸脱羧酶试验对照管培养前颜色为 紫色 。 沙门氏菌生化实验丙二酸钠试验阳性结果为由 绿色 变为 蓝色 。 沙门氏菌生化靛基质试验阳性结果为 红色。 BS琼脂应于制备后(第二天)使用,且超过48h后会降低其选择性。 按照G 按照G 按照G TSI中的三糖指的是 葡萄糖、乳糖和蔗糖。 TSI中三糖含量最少的糖为 葡萄糖。 TSI培养后斜面红色,底层黄色,表明所培养细菌不发酵 乳糖和 蔗糖 。 血清凝集试验中首先使用的多价O血清为A-F多价。 位相变异试验方法有 小玻管法 、小导管法 和 简易平板法 。 沙门氏菌血清凝集的抗原类型有 O抗原 、 H抗原 和 Vi抗原 。 O抗原血清凝集试验使用 生理盐水 作对照检测是否自凝。 已知具有Vi抗原的菌型有 伤寒沙门氏菌 、 丙型副伤寒沙门氏菌 和 都柏林沙门氏菌 。 沙门氏菌血清学分群主要依据 O 抗原结果。 Vi 抗原的存在阻止了O抗原的凝集反应,可通过浓菌液于酒精灯火焰上 煮沸 后再检查。 按照G 食源性疾病:通过 摄食 进入人体内的各种 致病因子 引起的、通常具有 感染性质或中毒性质 的一类疾病。 食物中毒:指摄入了含有 生物性、化学性 有毒有害物质的食品或把有毒有害物质当作食品摄入后所出现的 非传染性急性、亚急性疾病。 细菌性食物中毒:指因摄入 细菌性中毒食品(被致病菌或其毒素污染的食品)引起的食物中毒。 沙门氏菌中毒急性胃肠炎症状:恶心、呕吐、腹痛、腹泻、发热38~40℃,重者出现神经系统症状。 大肠埃希氏菌食物中毒中毒食品主要是动物性食品,熟肉、蛋类。 肠出血性大肠埃希氏菌致病机制:产生志贺样毒素,肠溶血毒素(O157)中毒表现:出血性结肠炎----严重的腹痛、便血,重者出现 溶血性尿毒症 。 葡萄球菌肠毒素:污染食物可引起食物中毒其耐热,100℃,30分钟灭活;破坏食物中的肠毒素需要100℃,2小时。 金黄色葡萄球菌食物中毒由肠毒素引起以 呕吐 为主要症状。 副溶血弧菌临床表现为上腹部绞痛,水样便腹泻、部分患者出现 血水便和粘血便;但少有里急后重。 中毒检样的处理:非病源检样包括可疑食物、水样及环节样品等最好按1∶10的比例用胰大豆胨肉汤(TS 大肠埃希氏菌0157:H7增菌肉汤为 改良EC肉汤,分离平板为 改良山梨醇麦康凯平板 和 改良CHROMagarO157显色平板。 在改良山梨醇麦康凯平板上生长的大肠埃希氏菌0157:H7可疑菌落中,发酵山梨醇的呈 红 色;不发酵山梨醇的菌落呈 无 色,菌落中心呈较暗的 灰褐 色。 大肠埃希氏菌0157:H7的生化反应特征为:H2S阴性,靛基质阳性,MR阳性,VP阴性,氧化酶阴性,MUG试验阴性(无 荧光),山梨醇阴性或迟缓发酵,棉子糖发酵阳性,赖氨酸/鸟氨酸脱羧酶阳性,动力有动力或无动力等。 在做大肠埃希氏菌0157:H7的血清学试验时,先做O157凝集,后做H7凝集,注意自凝菌,用 生理盐水做阴性对照。 大肠埃希菌的抗原由 菌体抗原(O)、表面抗原(K)和 鞭毛抗原 检测大肠埃希氏菌0157:H7使用免疫磁珠捕获法时,样品取样量为25g(ml)按照1:9的比例无菌加入增菌液进行增菌。捕获后洗涤,洗液为PBS-Tween20,洗涤次数为3 次。 进食被副溶血性弧菌污染的食物后10小时左右出现上腹部阵发性绞痛、腹泻,多数患者在腹泻后出现恶心、呕吐,腹泻多为 水样便,重者为黏液便和黏血便。呕吐、腹泻严重,失水过多者可引起虚脱并伴有血压下降。 典型的副溶血性弧菌在TCBS上呈圆形、半透明、表面光滑的绿色菌落,用接种环轻触,有类似 口香糖 的质感。 神奈川试验,副溶血性弧菌阳性菌落周围呈 β 溶血。
过氧化氢酶试验采用临用时配制的3%过氧化氢溶液,于半分钟内发生气泡者为阳性,不发生气泡者为阴性;单增李斯特氏菌过氧化氢酶试验为阳性。 在0.6%酵母浸膏胰酪大豆琼脂(TSA-Y 在PALCAM琼脂上,李斯特氏菌水解七叶苷与铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素。 科玛嘉单增李斯特氏菌显色培养基中,因显色底物检测到β-葡糖苷酶,李斯特菌生长为蓝绿色规则圆形菌落;而单增李斯特菌菌落因磷脂酶活性使得蓝绿色菌落带有不透明的晕环。 单增李斯特氏菌增菌液选用LB肉汤,LB分为LB1和LB2,两者基础培养基相同,区别在于添加辅助试剂丫啶黄、萘啶酸的量。 单增李斯特氏菌在20-25℃时可着生4根周生鞭毛,在37℃时鞭毛较少或仅着生一根端毛。 单增李斯特氏菌溶血试验中,一般用英诺克李斯特氏菌做阴性对照。 增李斯特氏菌的增菌液为LB1,培养温度为30±1℃ ,培养时间为24h;二次增菌用LB2,培养温度为30±1℃ ,培养时间为18h-24h。 阪崎肠杆菌在加热60℃,30 min可被杀死,对一般消毒剂敏感,但对 低温 有耐受力。 阪崎肠杆菌的分纯培养基为TSA平板,分纯培养条件为25±1℃培养48±4 对样品中阪崎肠杆菌进行MPN计数法定量检测时,取样量为10 报告阪崎肠杆菌时,综合菌落形态和生化特征,报告每100 g(mL)样品中检出或未检出阪崎肠杆菌。 在配置mLST-Vm时,需每10mLmLST加入添加剂万古霉素,其在混合液中的终浓度为10μg/mL。需注意的是配置好的mLST-Vm必须在24h时间内使用。 按照《2013年国家食品污染和有害因素风险工作手册》分离创伤弧菌时,在3%氯化钠碱性蛋白胨水中的增菌时间为12-16 h。 按照《2013年国家食品污染和有害因素风险工作手册》对创伤弧菌进行纯培养,选用的培养基为mCPC或C 创伤弧菌在3%NaCl三糖铁中的反应为底层变黄不变黑、无气泡、斜面颜色 不变或红色加深 、偶尔斜面 变黄 。 创伤弧菌在无NaCl和高于 8 %NaCl中不生长。 分离创伤弧菌时,冷冻产品在2℃~5℃解冻不应超过 18 创伤弧菌为革兰氏阴性菌,呈 棒 状或 弧 状。 分离创伤弧菌的培养基mCPC全称为 改良纤维二糖-多粘菌素B-多年菌素 对鱼类和头足类动物进行创伤弧菌分离后,应取 表面组织、肠或腮。 使用API20E生化鉴定试剂盒进行创伤弧菌鉴定时,应用 3%NaCl 溶液制备成浊度适当的菌悬液。 铜绿假单胞菌(P.Aeruginos 铜绿假单胞菌含有 O抗原(即菌体抗原)以及H抗原(即 鞭毛 抗原) 铜绿假单胞菌能氧化分解_葡萄糖_和木糖,但不分解乳糖和蔗糖。 铜绿假单胞菌对化学药物的抵抗力比一般革兰氏阴性菌 强 。 铜绿假单胞菌采用的检测方法是滤膜法。将250ml水样用孔径为0.45μm的滤膜过滤。并将滤膜移至CN琼脂 选择性培养基上,于36℃很为培养箱培养48h。 铜绿假单胞菌做乙酰胺肉汤生化试验时,将纯化物接种到乙酰胺肉汤中,在36±1℃下培养20~24h。然后向每支试管培养物加入1-2滴钠氏试剂,检查各试管的产氨情况,如表现出从 深黄色到 砖红 色的颜色变化,则为阳性结果,否则为阴性。 检测铜绿假单胞菌时,在CN平板上呈红褐色且氧化酶阳性的培养物接种于金氏B培养基上,于36℃±1℃恒温箱培养24h-5d。每天取出在紫外灯下检查其是否产生_荧光,将5d时间内 产生荧光的菌落记录为阳性。 致泻性大肠埃希氏菌根据其致病机制,至少可分为: 肠产毒素大肠埃希氏菌(ETE IMVIC实验包含吲哚(靛基质I)、甲基红(M)、VP(V)及枸橼酸盐利用 致泻大肠埃希氏菌的抗原结构较为复杂,主要由菌体(O)抗原、鞭毛 致泻大肠埃希氏菌是氧化酶 阴性 、革兰氏染色为阴性 的杆菌。 致泻大肠埃希氏菌检验中,要综合 生化试验 和 血清学试验 ,才能报告结果。 致泻大肠埃希氏菌在三糖铁培养基上,斜面 产酸或不产酸,底层 产酸,H2S 阴性 。 用EC肉汤对食品中致泻大肠埃希氏菌增菌,增菌温度为 44.5℃±0.2℃ ,增菌时间为18h--24h。 ETEC是致泻大肠埃希氏菌中的 肠产毒素大肠埃希氏菌 。 EIEC是致泻大肠埃希氏菌中的 肠侵袭性大肠埃希氏菌 。 EAEC是致泻大肠埃希氏菌中的肠集聚性粘附性大肠埃希氏菌。 EHEC是致泻大肠埃希氏菌中的 肠出血性大肠埃希氏菌 感染后临床表现很像细菌性痢疾的致泻大肠埃希氏菌是肠侵袭性大肠埃希氏菌,简写EIE 改良EC肉汤(mEC+n)中加入的抗生素是 新生霉素 。 目前国际公认的细菌分子分型的“金标准”是 PFG PFGE分离不同DNA分子的依据是:基于不同DNA分子量的差异。 最低抑菌浓度是指:体外培养细菌18至24小时后能抑制培养基内病原菌生长的最低药物浓度。 耐药性是指细菌对药物所具有的 相对抵抗力。 耐药性的程度以该药对细菌的 最小抑菌浓度 表示; 细菌的耐药性分为 固有耐药性 和 获得耐药性; 获得耐药性的产生具有三个因素 染色体突变 、 质粒介导的耐药性 和 转座子介导的耐药性; 铜绿假单胞菌对多种抗菌药物具有固有耐药性是因为对抗菌药物的通透性比其他阴性菌 低 和存在主动外排机制。 最常见的青霉素结合蛋白介导的耐药菌是(耐甲氧西林金黄色葡萄球菌)。 在耐药谱方面,基因突变导致的耐药性是 单一耐药 ,而R质粒导致的耐药性是指 多重耐药。 多重耐药菌 是指对临床使用的(三类或三类以上)的抗菌药物同时呈现耐药的细菌。 纸片扩散法反映细菌对被测药物的敏感程度的标志是 抑菌圈的大小。 CLSI推荐的体外抗生素敏感性实验有两种: 稀释法 和 扩散法 耐药性实验稀释法包括 琼脂稀释法 、 常量肉汤稀释法 、 微量肉汤稀释法。 仪器设备应在 检定 、 校准 有效期内使用,并定期做好 期间核查 。 根据国家年度监测计划组织制定本监测区域食品污染及有害因素年度监测实施方案,并组织监测工作的贯彻实施、定期检查、总结和报告工作是 项目负责人 的职责。 同一件样品采集应由 2 名以上的专业技术人员同时完成。 技术人员应熟悉检测项目的食品安全限量标准,对于超标样品需要进行 复核检验 。 数据上报人员要对数据的 有效位数 、 方法依据 、 检测限 、 计量单位 进行核实。 原始记录书写应使用蓝/黑色钢笔或签字笔。 通过定量方法、半定量方法或定性方法对每批成品培养、营养成分或添加剂进行评价。实验室通常使用半定量方法和定性方法就能满足培养基性能测试要求。 标准菌株也称模式菌株,是细菌实验室进行质控工作必不可少的重要生物资源,可用于培养基质量评价、实验阳性对照、检验方法验证和实验室运作评价。 储存菌株通常从冻干或超低温保存的标准储存菌株进行制备。制备储存菌株应避免导致标准储存菌株的交叉污染和(或)退化。 保存的菌种需按规定时间进行传代,以保证菌种活力,菌株的传代次数(自原始菌种冻干粉起)一般不得超过5次。 依据中华人民共和国认证认可条例,由 省级及以上人民政府产品质量监督管理部门或其授权的部门对检验机构及实验室进行认定。 经认证认可的检验机构或实验室必须严格进行内部质量管理和质量控制,有效期内必须满足中华人民共和国认证认可条例的要求。 通过认可的检验机构或实验室,应通过有效的质量管理与控制,以保证其检验检测能力能持续、稳定地符合认可条件。 未经认证认可的的检验机构或实验室,不得从事列入强制性产品认证目录产品的检验、检测_活动。 检验机构或实验室应当依法设立,保证客观、公正和独立的从事检验检测活动,并承担相应的法律责任。 实验室应具备与其从事检验检测活动相适应的专业技术人员和管理人员,并且必须 持证上岗。 实验室应由熟悉各项检验检测方法、程序和结果的人员对检验检测的关键环节进行 监督 。 质量控制管理体系文件包括:质量手册、程序文件、作业指导书、记录。 实验室质量控制应保证其管理体系内所有文件都必须 现行有效。 实验室在确认了潜在的不符合原因时,应当采取 预防措施。 实验室应当通过实施纠正措施、预防措施,持续改进完善其管理体系。 每次检验检测的记录应包含足够的信息以保证其能够再现。 定期内部审核一般是审核管理体系的全部要素,并且由与其工作无直接责任的_内审员来进行。 内部审核主要是审核体系运行中对管理体系各要素的符合性,管理评审主要是评审管理体系的有效性。 实验室人员经过与其承担的任务相适应的教育培训,并有相应的专业技术知识和经验。 实验室的设施条件主要指场地、能源、设备,环境条件主要指温度、湿度、噪音、通风、采暖,实验室的设施及环境条件应做到不影响监测结果的质量。 检测区域的工作相互之间有不利影响是应采取有效的隔离措施。 实验室采用的所有检测方法都必须现行有效。 实验室所用的与检测结果直接相关的设备都必须进行检定,并标贴唯一性标识,在检定周期内还应该进行期间核查。 购买标准物质(参考物质)应同时索要标准物质证书,并且应在有效期内使用,为保证其对校准物质的置信度,还应对其进行期间核查。 实验室建立检验样品的唯一识别系统的目的是避免样品或记录中的混淆。 样品的储存环境条件应满足相关技术规范或标准的要求。 为保证检测结果的准确性、有效性,实验室必须适时采取质量控制。 为保证其检测能力持续符合,应按照标准定期开展能力验证。 实验室对检测结果的准确性、有效性采取质量控制的方法有能力验证,内部质量控制,实验室比对。 经认证的实验室出具的检测结果或数据必须保证准确、客观、真实。 经实验室资质认证合格的实验室出具报告可以使用的标志是CMA。 实验室紫外线消毒:在无人条件下,可采取紫外线消毒最用时间不少于30分钟,室内温度在20-40度之外、相对湿度大于60%时应适当延长照射时间。 从标准菌株保藏中心获得的真空保存的菌株或至少定义到属或种水平,来源已知,性能稳定称为标准菌株。 标准菌株在实验室经过一次传代获得的一组相同的菌株称为标准储备菌株。 由标准储备菌株经过一次传代得到的菌株称为工作菌株 。 新购置的玻璃器皿用5%氢氧化钠和3%稀酸分别浸泡24小时,清洗后使用。 二、选择题